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  • 用這個(gè)方法使用檸檬酸鈉緩沖液,既簡單又安全
  • 點(diǎn)擊次數(shù):1957 更新時(shí)間:2022-04-25
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  •   檸檬酸鈉緩沖液0. 01mol/L,pH6.0是一種常用的抗原修復(fù)液,可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而改善免疫染色效果。
     
      通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理??乖迯?fù)可以提高石蠟切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰凍切片的染色效果。當(dāng)冰凍切片免疫染色效果不理想時(shí),考慮進(jìn)行抗原修復(fù)。
     
      按照每個(gè)片子需要10ml抗原修復(fù)液計(jì)算,1L抗原修復(fù)液可以用于100個(gè)樣本的抗原修復(fù)。
     
      檸檬酸鈉緩沖液的使用方法:
      本產(chǎn)品是干粉形式,使用前用去離子水或蒸餾水按產(chǎn)品規(guī)格溶解至1L或2L,即可使用。
      1、對于石蠟切片:
     ?、倜撓灒憾妆?次,每次3-5min→無水乙醇2次,每次3-5min→95%乙醇1次,3-5min→90%乙醇1次,3-5min→75%乙醇1次,3-5min→蒸餾水洗2次,每次3-5min。
     ?、诳乖迯?fù):將切片浸泡在檸檬酸修復(fù)液中,95-100℃加熱約15min。檸檬酸修復(fù)液使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30min內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次,每次3-5 min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
     
      2、對于冰凍切片:
      用免疫染色洗滌液洗滌切片5min。將切片浸泡在檸檬酸修復(fù)液中,95-100℃加熱約15min。檸檬酸修復(fù)液使用前需預(yù)熱到95-100℃。加熱可以使用普通的水浴鍋,也可以使用微波爐加熱。如果使用微波爐加熱,需注意避免暴沸和過多的水分蒸發(fā)。隨后大約在20-30min內(nèi)冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌1-2次,每次3-5min。隨后即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
     
      3、對于其它樣品的抗原修復(fù),可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進(jìn)行。
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