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技術(shù)文章首頁(yè) > 技術(shù)文章 血清熱滅活對(duì)細(xì)胞的影響
  • 血清熱滅活對(duì)細(xì)胞的影響
  • 點(diǎn)擊次數(shù):3176 更新時(shí)間:2016-03-10
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  • Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化;有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用,在用SV-BHK、BALB-3T3、CV-1、FS-4細(xì)胞對(duì)細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)中,熱滅活對(duì)胎牛血清的影響小于對(duì)小牛血清的影響。

    我們調(diào)查了熱滅活對(duì)胎牛血清以及對(duì)其中不同細(xì)胞株生長(zhǎng)能力的影響。通過(guò)比較11個(gè)不同細(xì)胞株,發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對(duì)6個(gè)細(xì)胞株(HBAE,MDBK,Vero,成纖維細(xì)胞,MRC-5)的生長(zhǎng)帶來(lái)負(fù)面影響,三個(gè)細(xì)胞株(FOX-NY,MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響,而只有兩個(gè)細(xì)胞株(Balb/3T3,Sp2/0Ag14 hybrid),在熱滅活之后,細(xì)胞生長(zhǎng)有輕微的改善。所以,在正常的操作下,熱滅活通常對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用。在正常操作下,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來(lái)負(fù)面的影響,對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,而導(dǎo)致的沉淀又常常被認(rèn)為是微生物的污染。注意到這個(gè)現(xiàn)象之后,為了驗(yàn)證污染的存在,或者促進(jìn)沉淀的溶解,許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟,血清中的蛋白進(jìn)一步的析出,為了確信血清未被污染,進(jìn)行的鏡檢,無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn),和革蘭氏染色試驗(yàn)更是浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)者大量的時(shí)間和精力。

           總之,多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下,熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng),卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來(lái)不必要的麻煩。我們建議,對(duì)于那些對(duì)血清進(jìn)行滅活的用戶,需要通過(guò)試驗(yàn)來(lái)證實(shí)其必要性,確定滅活的適當(dāng)條件;在滅活過(guò)程中,需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測(cè),并選擇一個(gè)可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。

       

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