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技術(shù)文章首頁 > 技術(shù)文章 根據(jù)不同組織類型合理選用組織細胞固定液
  • 根據(jù)不同組織類型合理選用組織細胞固定液
  • 點擊次數(shù):2555 更新時間:2015-11-12
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  •    凡進行病理檢驗的各種組織都需要進行固定,固定可使組織、細胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置。

      對不同類型的組織應(yīng)適當(dāng)合理地選擇組織細胞固定液,特殊病例或特殊物質(zhì)應(yīng)選擇特殊的組織細胞固定液。有的固定液對于組織有膨脹作用。固定劑是一種化學(xué)試劑,有液體和固體之分,一般使用較多的是液體,而固體固定劑如多聚甲醛,則多用于實驗研究的組織固定。

      由于各種固定液對不同的組織有不同的作用,因此許多專家將根據(jù)各種固定液的優(yōu)缺點,配制出許多混合液的方法來,給組織的良好固定起到了非常積極的作用。但是,值得指出的是并非所有的固定液都不是十全十美的,例如,酒精、甲醛、醋酸固定液,對組織固定很好,組織中各物質(zhì)的染色也十分清晰,但對固定脫水盒為銅質(zhì)的組織時,效果就不好,原因是醋酸跟酮可發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生醋酸銅,沉淀于組織中,可造成對抗原的損害,對于免疫組織化學(xué)的顯示,經(jīng)實驗證明:可呈弱陽性乃至陰性。由此可見,組織細胞固定液的選擇正確與否決定著對某些病例的免疫組化標記的成敗關(guān)鍵。在我們的日常工作科研中,對于組織的固定,應(yīng)有針對性的選擇,方能獲得滿意的效果。

      下面給大家介紹幾種常見的組織細胞固定液。

      1、中性緩沖甲醛。該液能夠固定大多數(shù)組織結(jié)構(gòu),對脂類有較好的固定效果。免疫組化、原位雜交等試驗都可以使用。本液還可以長時間存放,是實驗室常備的組織細胞之一。固定液浸透較慢,固定時間不限,浸透之后可以長時間存放(免疫組化和原位雜交標本建議不要這么做)。美中不足是染色時酸性染料著色不佳,并且本液對糖類沒有固定作用。

      2、Bouin。過去常用的一種組織細胞固定液,主要用于軟化皮膚或者富含結(jié)締組織的標本,在胚胎標本處理中使用很廣。用本液處理后,酸性染料著色鮮艷。但是,由于含有苦味酸,不能用于原位雜交等實驗檢測。此外,本液對很多細胞器的破壞較大,尤其不適于固定腎臟標本。經(jīng)本液固定的標本,尺寸應(yīng)盡可能小,否則內(nèi)外固定的效果有所差別。本液可以較長時間存放,但標本在其中不應(yīng)久存,固定8 ~ 24 h為宜。

      3、AAF。該液由醋酸(A)、酒精(A)和甲醛(F)為主要成分,廣泛用于動植物組織的固定和各種實驗檢測,植物固定則是。固定液滲透均一,速度很快。固定時間一般為4 ~ 24 h。此液處理后,染色結(jié)果細膩,但酸性染料著色力下降。本液配制后可以短時間放置。

      4、Helly,Susa,Zenker。這是三種比較相近的固定液,含有汞鹽和重鉻酸鉀。經(jīng)這類固定液處理,標本對酸性和堿性染料均有較好的親和能力。染色處理前需要脫汞和脫碘操作。目前除了幾種傳統(tǒng)染色更鮮艷外,并無其他優(yōu)勢。

      5、Zamboni。用于免疫組化和免疫電鏡的組織細胞固定液。保存細微結(jié)構(gòu)和抗原特性的固定液之一。固定液浸透速度較慢,要求標本不能過大,常用于血管灌注。該液可以長時間存放,標本在其中也可以保存較長時間,抗原封閉作用相對較弱。由于含有苦味酸,故不用于原位雜交試驗。

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