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技術(shù)文章首頁 > 技術(shù)文章 分享!線粒體膜電位熒光探針用來檢測細(xì)菌膜電位的工作原理
  • 分享!線粒體膜電位熒光探針用來檢測細(xì)菌膜電位的工作原理
  • 點擊次數(shù):3248 更新時間:2022-09-20
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  •   線粒體膜電位熒光探針是一種廣泛用于檢測線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。其染料以電勢依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi),可以用來檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi),電位熒光探針聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強烈的紅色熒光(Ex=585nm,Em=590nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,本產(chǎn)品只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514nm,Em=529nm)。線粒體膜電位熒光探針不僅可用于定性檢測,因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測,因線粒體的去極化程度可以通過紅/綠熒光強度的比例來衡量。觀察時,只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。
     
      線粒體膜電位熒光探針用于檢測細(xì)胞的線粒體膜電位時常用的濃度范圍為1~20μg/mL,對于很多細(xì)胞適宜采用的濃度為10μg/mL。
     
      線粒體膜電位熒光探針用來檢測細(xì)菌膜電位的工作原理在于:
      線粒體膜電位熒光探針在所有細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)發(fā)綠色熒光,由于更高的膜電位引起染料分子發(fā)生自聚作用,使得染料的熒光往紅色發(fā)射波長處遷移,紅色熒光強度增高,此時紅色/綠色熒光信號比高。質(zhì)子離子載體比如CCCP,通過去除質(zhì)子梯度來破壞線粒體膜電位,從而導(dǎo)致紅色熒光強度降低,此時紅色/綠色熒光信號比降低。線粒體膜電位熒光探針的最大激發(fā)和發(fā)射波長約482nm和497nm。經(jīng)線粒體膜電位熒光探針標(biāo)記的細(xì)胞用流式細(xì)胞儀分析(用488nm激發(fā),分別用適合FITC(綠色)和Texas Red(紅色)的發(fā)射濾片來檢測)。
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