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技術(shù)文章首頁(yè) > 技術(shù)文章 分析ELISA檢測(cè)試劑盒的操作步驟和注意事項(xiàng)
  • 分析ELISA檢測(cè)試劑盒的操作步驟和注意事項(xiàng)
  • 點(diǎn)擊次數(shù):1744 更新時(shí)間:2020-05-27
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  •    ELISA檢測(cè)試劑盒法檢測(cè)具有高效、快捷、易批量操作等優(yōu)點(diǎn),不同的生產(chǎn)廠家提供不同種類,不同類型的Elisa試劑盒產(chǎn)品,為科研用戶帶來極大的方便。ELISA檢測(cè)試劑盒能夠針對(duì)特定檢測(cè)源,制備特異性抗原抗體,根據(jù)應(yīng)用需要量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制檢測(cè)試劑成本。
     
      操作步驟:
      1、從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。
      2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品 50μL;
      3、樣本孔中加入待測(cè)樣本 50μL;空白孔不加。
      4、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。
      5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板 5 次。
      6、每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
      7、每孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值。
     
      ELISA檢測(cè)試劑盒的注意事項(xiàng):
      1、嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
      2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
      3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響 OD 值。
      4、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
      5、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
      6、在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
      7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
      8、任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
      9、不能使用過期產(chǎn)品。
      10、如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
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