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　　使用試劑，您可以獲得：

　　1、在多種細(xì)胞系中具有*地轉(zhuǎn)染效率和較高水平地重組蛋白表達(dá)。

　　2、傳輸siRNA的優(yōu)異性能。

　　3、在有血清存在的情況下可保證轉(zhuǎn)染效力——轉(zhuǎn)染后無(wú)需更換培養(yǎng)基。

　　4、保證可以用于高通量應(yīng)用的試劑。

　　5、用于建立穩(wěn)定細(xì)胞系的可靠試劑lip3000脂質(zhì)體3000試劑為大多數(shù)細(xì)胞提供了zui高的轉(zhuǎn)染效率和活性。當(dāng)存在血清或用于進(jìn)行蛋白表達(dá)的細(xì)胞系（如COS-7，CHO和293）時(shí)，lip3000脂質(zhì)體3000尤為有效，效率可超過(guò)90%。

 

　　注意事項(xiàng)：

　　要求細(xì)胞鋪板密度較高，以90%-95%為佳，這有助于減少陽(yáng)離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性造成的影響?？捎糜谟醒迮囵B(yǎng)基的轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基，使得操作方便了許多，但是要注意制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時(shí)要求用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋DNA和轉(zhuǎn)染試劑，因?yàn)檠鍟?huì)影響復(fù)合物的形成。

　　復(fù)合物形成后是可以加入血清。這里要特別注意檢測(cè)所用的無(wú)血清培養(yǎng)基是否能和lip3000脂質(zhì)體3000匹配，比如已知CD293,SFMII,VP-SFM就不行。此外還應(yīng)該留意，如果研究的基因要求比較長(zhǎng)的表達(dá)時(shí)間，比如細(xì)胞周期相關(guān)基因，或者時(shí)細(xì)胞表面蛋白，選擇細(xì)胞鋪板密較低的轉(zhuǎn)染試劑，不適合用lip3000脂質(zhì)體3000。

　　對(duì)于大多數(shù)陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑，應(yīng)優(yōu)化DNA濃度和陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑量以得到zui大的轉(zhuǎn)染效率。DNA和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2或者1:3，優(yōu)化可以從0.5-5之間慢慢試。使用小劑量確定的優(yōu)化條件可以用于進(jìn)行大劑量的轉(zhuǎn)染，只要根據(jù)培養(yǎng)板表面比例線性增加鋪板細(xì)胞的數(shù)目、陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑和DNA量就可以了。

　　還有轉(zhuǎn)染的時(shí)候培養(yǎng)基中不能添加抗生素?？股兀热缜嗝顾睾玩溍顾?，一般對(duì)于真核細(xì)胞無(wú)毒，但陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑增加了細(xì)胞的通透性，使抗生素可以進(jìn)入細(xì)胞。這降低了細(xì)胞的活性，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率低。所以，在轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中不能使用抗生素，甚至在準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染前進(jìn)行細(xì)胞鋪板時(shí)也要避免使用抗生素。這樣，在轉(zhuǎn)染前就不必潤(rùn)洗細(xì)胞。對(duì)于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，不要在選擇性培養(yǎng)基中使用青霉素和鏈霉素，因?yàn)檫@些抗生素是GENETICIN選擇性抗生素的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。另外，為了保證無(wú)血清培養(yǎng)基中細(xì)胞的健康生長(zhǎng)，使用比含血清培養(yǎng)基更少的抗生素量。

　　陽(yáng)離子脂質(zhì)體應(yīng)該在4度保存，要注意避免多次反復(fù)長(zhǎng)時(shí)間開(kāi)蓋，因?yàn)榭赡軙?huì)導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率。當(dāng)然還有要注意質(zhì)粒的質(zhì)量，質(zhì)粒的內(nèi)毒素是轉(zhuǎn)染的大敵。